用于临床前药物潜在致癌性评价小鼠二代模型----KI.C57-ras v2.0

KI.C57-ras（致癌性评价模型V2.0）是在原Tg.C57-ras（致癌性评价模型Tg.C57-ras V1.0）基础上，进一步改进建立的致癌性评价模型。本模型采用干细胞打靶方式构建，将人c-Ha-ras基因（3个拷贝），首尾串联，准确插入小鼠15号染色体E3位点获得的可稳定遗传的小鼠模型。与V1.0相比，具有转基因表达水平更高，遗传更加稳定，个体间差异更小的优势；目前已经获得的部分致癌性验证结果显示，该模型对致癌物易感，与国际上通用的模型具有相似的表型。

1、二代模型构建策 

KI. C57-ras 打靶载体

1.全序列合成基因；2. 定点插入15E3位点；3. 3个拷贝；4. 首尾串联；5. C57BL/6干细胞

2、二代模型KI.C57-rasV2.0蛋白水平及与日本rasH2模型的蛋白水平比较 

3、二代模型KI.C57-rasV2.0的生长曲线 

生长曲线分性别测定，每组25只；1-8月龄，覆盖模型使用时段；结果与野生小鼠无异

4.模型的致癌性药物验证实验

4.1临床观察

溶媒对照组未见异常改变。MNU组（75 mg/kg）动物于D2可见体重减轻；KI.C57-ras 动物D56可见外部体表肉瘤，多发组织是阴皮区域; D63统计, 雄性动物16/25，性动物8/25出现肉瘤。在部分小鼠，爪子，舌上均发现肿瘤。而wt等动物同期未见临床异常改变

4.2体重变化 

4.3 MNU给药后生存率曲线 

4.4致癌性实验——病理解剖肿瘤发生 

结语：综上，本模型从遗传学角度看，与日本模型极其相似，即插入位点相似，基因序列一致，基因排列顺序一致，基因拷贝数一致，且小鼠模型背景一致；从现代遗传学知识认识，可以预测本模型与日本raSH2具有相同，或者非常接近的表型。从我们开展过大半的致癌性验证实验来看，实验结果非常符合预期，与国际上公认的rasH2小鼠模型有相似的表型，故我们认为可以用于致癌性实验。

来源：国家啮齿类实验动物资源库